Диагностика хронической гранулематозной болезни

, медицинский эксперт, редактор
Последняя редакция: 16.05.2018

Диагностика

Диагностика хронической гранулематозной болезни базируется на оценке функциональной активности фагоцитов. Используются следующие тесты:

  1. Тест восстановления нитросинего тетразолия (НСТ-тест). В норме при поглощении фагоцитами желтого красителя нитросинего тетразолия (ИСТ) их метаболическая активность возрастает, при этом НСТ окисляется, а продукты зтой реакции окрашиваются в синий цвет. При нарушении метаболизма фагоцитов интенсивность синего окрашивания снижается.
  2. Хемилюминесценция нейтрофилов. Окисление субстрата сопровождается излучением ультрафиолетового света или флуоресценцией, по интенсивности излучения можно судить о функциональной активности фагоцитов.
  3. Оценка фагоцитарной активности: способность фагоцитов уничтожать каталазо-позитивные бактерии in vitro.
  4. Генетическое обследование пациентов и их семей при выявлении нарушений функциональной активности фагоцитов.

Определение типов и подтипов хронической гранулематозной болезни

Для определения типов и подтипов хронической гранулематозной болезни, как правило, используется иммуно-блоттинг с использованием антител ко всем 4 компонентам НАДФ-оксидазы. Если один из цитозольных компонентов (р47phax или p67phax) отсутствует в блоте, это указывает на мутацию в соответствующем гене, тогда как при отсутствии одного из мембранных компонентов (gр91phax или р22phax) другой также не определяется, т.к. субъединицы стабилизируют друг друга для полного созревания и экспрессии. Ряд исследователей используют цитофлоуметрию с применением анти-цитохром p558 антител для определения gp91phax/p22phax нa поверхности нейтрофилов. В конечном итоге диагноз подтверждается выявление мутации соответствующего гена.

Пренатальная диагностика хронической гранулематозной болезни

До того, как стало возможным использование молекулярно-генетических технологий, пренатальная диагностика хронической гранулематозной болезни осуществлялась путем определение НАДФ-оксидазной активности нейтрофилов крови плода, производился забор пуповинной крови посредством фетоскопии на 16-18 неделе гестации. В настоящее время проводится ДНК-анализ клеток амниотической жидкости или хорионических ворсинок для поиска специфических дефектов генов с помощью Southern-блоттинга, полимеразной цепной реакции и исследованием полиморфизма длины фрагментов рестрикции, что является более надежным методом и дает возможность постановки диагноза на более ранних сроках беременности.

Важно знать!

Синдром Костманна (детский генетически детерминированный агранулоцитоз) - наиболее тяжёлая форма наследственной нейтропений. Тип наследования - аутосомно-рецессивный, могут быть спорадические случаи и доминантный тип наследования. Читать далее...